База знаний для подготовки к ОГЭ и ЕГЭ, проверенная Российской академией наук

Секвенирование ДНК (ЕГЭ-ОГЭ)

Секвени́рование ДНК — это метод, с помощью которого устанавливают последовательность нуклеотидов в молекуле ДНК, что даёт возможность исследовать генетическую информацию организмов. Данный способ является основополагающим в молекулярной биологии, генетике и биотехнологии.

Описание

Дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) представляет собой макромолекулу, выполняющую функции хранения, передачи и реализации генетической информации в живых организмах. Молекулярная структура ДНК имеет форму двойной спирали, образованной двумя полинуклеотидными цепями, скрученными вокруг одной оси.

Нуклеотиды — мономеры, составляющие молекулу ДНК, каждый из которых включает азотистое основание, сахар дезоксирибозу и фосфатную группу. В ДНК выделяют четыре вида азотистых оснований:

Нуклеотиды соединяются между собой фосфодиэфирными связями, формируя полимерные цепи. Две такие полинуклеотидные цепи формируют двойную спираль, стабилизированную водородными связями между комплементарными основаниями:

  • Аденин (A) связывается только с тимином (T) двумя водородными связями.
  • Гуанин (G) связывается только с цитозином (C) тремя водородными связями.

Цепи в двойной спирали антипараллельны, то есть их направления обратны: одна идёт от 5' → 3', а вторая — от 3' → 5'.

Методы секвенирования

Метод Сэнгера

На протяжении долгого времени основным подходом к секвенированию ДНК оставался метод Сэнгера, созданный Фредериком Сэнгером в 1977 году. Суть метода заключается в синтезе новой ДНК-цепи с применением специальных нуклеотидов — дидезоксинуклеозидтрифосфатов (ddNTP), способных прерывать удлинение цепи при их включении.

В ходе реакции образуются фрагменты ДНК различной длины, каждый из которых завершается определённым нуклеотидом. По длине фрагменты разделяют методом электрофореза в полиакриламидном геле. По результатам разделения устанавливают последовательность нуклеотидов исходной молекулы ДНК.

Секвенирование нового поколения

Технологии, называемые секвенированием нового поколения (англ. Next-Generation Sequencing, NGS), дают возможность одновременной расшифровки миллионов фрагментов ДНК. Данный подход существенно ускоряет процедуру и уменьшает затраты на секвенирование, что расширяет перспективы в области геномных исследований, медицинской диагностики и персонализированной медицины.

Заключение

Секвенирование ДНК представляет собой незаменимый инструмент современной биологии, дающий возможность анализировать структуру генома и его функции.

Литература