Спалланцани изучает лягушку через увеличительное стекло. Памятник в Скандиано (Эмилия-Романья)
Результатом его путешествия в Неаполь, Сицилию и в Апеннины явилось его сочинение «Viaggi alle due Sicilie e in alcune parti degli Apennini» (Павия, 1792), которое появилось и в немецком переводе в 1795 году. Все эти результаты его путешествий очень ценны в естественноисторическом отношении.
Спалланцани знаменит и своими чисто физиологическими открытиями в области кровообращения, пищеварения, размножения лягушек, наблюдениями за простейшими животными и особым чувством навигации в полной темноте (эхолокации), присущим летучей мыши. Большой интерес представляют его опыты над угнетающим действием холода на газовый обмен у холоднокровных животных, над обезглавливанием улиток с последующим вырастанием головы, над механизмом совокупления у лягушек, над искусственным пищеварением желудочным соком; им же впервые было доказано, что оплодотворяющей силой в семени обладают только сперматозоиды. Опытным путем доказал невозможность самозарождения микроорганизмов.
Зная, что у него больной мочевой пузырь, перед смертью Спалланцани завещал: «Выньте его и сохраните после моей смерти, может быть, оно поможет вам открыть какой-нибудь новый факт относительно болезней мочевого пузыря».