Микробиуретовый метод
Микробиуре́товый ме́тод (метод Бенеди́кта) — колориметрический метод количественного определения содержания белка. Основан на взаимодействии пептидных связей с ионами Cu2+ в щелочной среде. Является более чувствительным, чем биуретовый метод и позволяет определять белок от 0,1 до 2 мг (при условии отсутствия других ароматических соединений в испытуемом образце)[1]. Применяется для анализа биологических жидкостей, например плазмы и сыворотки крови. Разработан Рут Ф. Иджаки, Д. М. Гиллом и впервые описан в статье «A micro-biuret method for estimating proteins» в 1964 году[2].
Общие сведения
| Микробиуретовый метод | |
|---|---|
| Область использования | Аналитическая химия, биохимия |
| Дата появления | 1964 год |
| Автор понятия | Рут Ф. Иджаки, Д. М. Гилл |
Принцип
К анализируемой пробе, содержащей белок добавляют раствор щёлочи (например, NаОН) и реактива Бенедикта. В результате реакции образуется комплекс, окрашенный в фиолетовый цвет. Интенсивность окраски пропорциональная содержанию белка. Перемешивают при комнатной температуре и через 15 мин спектрофотометрируют на длине волны 330 нм. Построение калибровочного графика проводят по стандартному раствору белка[3].
См. также
Примечания
- ↑ Левашов П. А., Филатова Л. Ю., Ломакина Г. Ю., Зоров И. Н. Методическая разработка по курсу Препаративная и аналитическая биохимия. — М.: Московский государственный университет им. М. В. Ломоносова, 2022. — 80 с.
- ↑ Ruth F. Itzhaki, D.M. Gill. A micro-biuret method for estimating proteins // Analytical Biochemistry. — 1964-12. — Т. 9, вып. 4. — С. 401–410. — ISSN 0003-2697. — doi:10.1016/0003-2697(64)90200-3.
- ↑ Ильючик И. А., Федоренко М. П., Никандров В. Н. Биохимия. Введение: структурная биохимия. — Пинск: ПолесГУ, 2020. — 96 с.